Vero細胞系是一種源自非洲綠猴腎上皮細胞的永生化哺乳動物細胞模型，站在病毒學、微生物學以及細胞和分子生物學研究的前沿。它們的廣泛應用涵蓋疫苗開發(fā)、藥物篩選以及病毒和寄生蟲生物學、腫瘤免疫學和免疫治療策略的探索。

Vero細胞系的建立可以追溯到1962年，起源于非洲綠猴的腎上皮細胞。

Vero細胞克隆及其性質(zhì)

來自Vero細胞系的不同克隆顯示出區(qū)別于原始細胞系的特征。其中，兩個著名的Vero細胞克隆是:

• Vero E6細胞系:該克隆也稱為Vero C1008，來自Vero 76細胞，1979年由P.J. Price在微量滴定板上使用稀釋技術分離。Vero E6細胞特別適合培養(yǎng)復制緩慢的病毒。

• Vero 76細胞:這些細胞起源于1968年的一只非洲綠猴的腎臟，保持了Vero細胞的上皮形態(tài)特征。

這些Vero細胞變體與親代細胞系一起，繼續(xù)有助于推進病毒學研究和醫(yī)學干預措施的發(fā)展，標志著它們在科學界的重要性。

培養(yǎng)猴細胞系Vero細胞需要熟悉特定的參數(shù)，如倍增時間、接種密度和合適的生長培養(yǎng)基。

• 人口倍增時間:Vero細胞的倍增時間約為24小時。

• 堅持性:Vero細胞粘附在表面上，培養(yǎng)時通常形成單層。

• 播種密度:建議從1倍10^4 cells/cm^2.的播種密度開始為了培養(yǎng)粘附的Vero細胞，用PBS清洗它們并用Accutase處理它們以分離它們。分離后，離心細胞，將其重新懸浮在新鮮培養(yǎng)基中，并將其轉移到新的培養(yǎng)瓶中。

• 生長培養(yǎng)基:哈姆的F12和DMEM都是培養(yǎng)Vero細胞的合適培養(yǎng)基。這些應補充2.5mM L-谷氨酰胺和5%胎牛血清（FBS）以支持最佳生長。培養(yǎng)基應該每周更新兩到三次。

• 生長條件:Vero細胞在37°C的溫度和5% CO2的潮濕環(huán)境中生長旺盛。

• 存儲:對于長期儲存，Vero電池應保持在低于-150°C的溫度下，要么放在超低溫冰箱中，要么放在液氮的蒸汽相中。

• 冷凍過程和介質(zhì):對于冷凍保存，使用CM-1或CM-ACF或含有FBS和DMSO的生長培養(yǎng)基作為冷凍培養(yǎng)基。采用緩慢冷凍技術，每分鐘逐漸降低1°C的溫度。

• 解凍過程:將容器浸入37°C水浴中并輕輕攪動40-60秒，解凍Vero細胞。然后，在新鮮培養(yǎng)基中稀釋細胞，離心去除冷凍保護劑，重新懸浮在新鮮生長培養(yǎng)基中，并將其置于新的燒瓶中以恢復和生長。

• 生物安全等級:Vero細胞應在符合1級生物安全要求的實驗室中處理。

Vero細胞系在研究中的應用

Vero細胞系在細胞生物學和病毒學領域有許多研究應用。在這里，我們討論了一些具體的問題。

病毒研究和疫苗生產(chǎn)中的Vero細胞

源自非洲綠猴腎細胞的Vero細胞已成為多種病毒疫苗生物過程開發(fā)中的主要成分，包括脊髓灰質(zhì)炎病毒和日本腦炎病毒。它們在貼壁和懸浮培養(yǎng)中的適應性及其廣泛的病毒支持能力，包括對小反芻獸疫病毒等病原體的支持能力，突出了它們在病毒分離和疫苗開發(fā)中的重要性。

許多研究利用Vero細胞生產(chǎn)人類疫苗。例如，2019年發(fā)表的一項引人注目的研究證明了在黃熱病病毒滅活疫苗的開發(fā)中使用Vero細胞【2】。

Vero細胞通常用于病毒感染研究。

Vero細胞在組織工程和上游生物過程開發(fā)中的作用

除了疫苗生產(chǎn)，Vero細胞還有助于組織工程和更廣泛的生物過程開發(fā)領域，這強調(diào)了對其特性和應用進行持續(xù)研究的必要性。選擇合適的Vero細胞亞系是最大限度地發(fā)揮其在生物技術和制藥工業(yè)中的潛力的關鍵。

Vero細胞在藥物療效和安全性測試中的應用

Vero細胞經(jīng)常用于藥物測試，以評估藥物化合物的有效性和安全性。在研究各種藥物和治療劑的細胞毒性作用時，這些細胞通常被認為是正常腎細胞的標準模型。例如，研究比較了白骨壤植物根提取物對肝癌細胞系HepG2和猴腎上皮細胞Vero細胞的影響，發(fā)現(xiàn)提取物對癌細胞的損害比對正常細胞的損害更大。

Vero細胞的局限性

盡管vero細胞被廣泛使用，但它們也有其局限性，例如Vero毒素的產(chǎn)生和基因組的改變可能會影響某些應用。了解Vero細胞（包括Vero譜系F6）的特定亞系和基因組特征對于優(yōu)化其在各種生物過程中的應用至關重要。