SuperSYBR Mixture（With Low ROX）

SuperSYBR Mixture（With Low ROX）是專用于染料法（SYBRGreenⅠ）實時熒光定量 PCR 的預(yù)混體系，濃度為 2×，包含 SuperStarTaq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、SYBR Green I 熒光染料、Mg2+和 ROX 校正染料，操作簡單方便。主要用于基因組 DNA 靶序列和 RNA 反轉(zhuǎn)錄后 cDNA 靶序列的檢測。本品含有的 SuperStar Taq DNA Polymerase 是一種經(jīng)化學(xué)修飾的、全新高效熱啟動酶，在常溫下沒有聚合酶活性，有效避免在常溫條件下由引物和模板非特異性結(jié)合或引物二聚體而產(chǎn)生的非特異性擴增，酶的激活須在 95℃下孵育 10 分鐘。產(chǎn)品特點本產(chǎn)品中使用了全新高效熱啟動酶 SuperStar Taq DNA Polymerase與 PCR 緩沖體系，顯著提高 PCR 的擴增效率，具有高靈敏度和特異性強的特點。注意事項1. 使用前請上下顛倒輕輕混勻，盡量避免起泡，并經(jīng)短暫離心后使用。2. 本產(chǎn)品中含有 SYBR Green I 熒光染料和 ROX 染料，保存本產(chǎn)品或配制 PCR 反應(yīng)液時應(yīng)避免強光照射。3. 如需頻繁使用，可存放于 2-8℃，盡量避免反復(fù)凍融，反復(fù)凍融可能使產(chǎn)品性能下降。使用方法以下舉例為常規(guī) PCR 反應(yīng)體系和反應(yīng)條件，實際操作中應(yīng)根據(jù)模板、引物結(jié)構(gòu)和目的片段大小不同進行相應(yīng)的改進和優(yōu)化。

1. PCR 反應(yīng)體系(以 50ul 反應(yīng)體系為例)

   

2. PCR反應(yīng)程序建議采用下表顯示的兩步法 PCR 進行程序設(shè)定，本程序是以 ABI7500熒光定量 PCR 儀為例。若因 Tm 值較低的引物等原因，得不到良好的實驗結(jié)果時，可嘗試進行三步法 PCR 擴增。

注意：1）退火溫度請以 60-64℃作為設(shè)定范圍的參考，發(fā)生非特異性反應(yīng)時，可提高退火溫度。2）本說明是以 ABI 7500 熒光定量 PCR 儀為參照設(shè)定，融解曲線分析請以所使用的熒光定量 PCR 儀推薦的程序進行設(shè)定。3. 三步法熒光定量PCR（本程序是以ABI7500熒光定量PCR儀為例）：

注意：1）本產(chǎn)品所采用的熱啟動酶須在預(yù)變性 95℃、10 min 條件下實現(xiàn)酶的活化。2）無法得到理想的擴增效率時，適當(dāng)降低退火溫度；發(fā)生非特異性反應(yīng)時，提高退火溫度，由此優(yōu)化反應(yīng)條件。3）若需提高反應(yīng)擴增效率，可適當(dāng)增加延伸時間。4）本說明是以 ABI 7500 熒光定量 PCR 儀為參照設(shè)定，融解曲線分析請以所使用的熒光定量 PCR 儀推薦的程序進行設(shè)定。

特點:高效 熱啟動適用范圍:熒光定量 PCR保存條件：-20℃避光保存

本產(chǎn)品僅供科研使用，請勿用于臨床診斷及其他用途

上海牧榮生物科技有限公司

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SuperSYBR Mixture（With Low ROX）